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均質(zhì)機產(chǎn)品及方案
- 產(chǎn)品及方案
- 納米設(shè)備解決方案
應(yīng)用背景
乳酸菌是一類能發(fā)酵利用糖類物質(zhì)而產(chǎn)生大量乳酸的細菌，一類無芽孢、革蘭氏染色陽性細菌，它是一類對人體有益的菌群。乳酸菌發(fā)酵能產(chǎn)生大量的有機酸、醇類及各種氨基酸等代謝物，具有抑制腐敗菌、提高消化率、防癌等生理功效。乳酸菌是一類重要的工業(yè)菌株，具有降膽固醇、降血壓、抗腫瘤和提高機體免疫等作用，被廣泛應(yīng)用于食品發(fā)酵，有著重要的經(jīng)濟價值。
應(yīng)用案例
乳酸菌的應(yīng)用歷史非常悠久，但真正科學(xué)的研究和利用是始于19世紀中葉。近年來，利用乳酸菌系統(tǒng)表達外源蛋白也已引起廣泛關(guān)注，但由于乳酸菌屬于革蘭氏陽性菌，具有厚而致密的剛性細胞壁，致使乳酸菌內(nèi)源蛋白、表達的非分泌性外源蛋白以及其他非分泌性代謝產(chǎn)物的提取效率極低。因此，研究乳酸菌破壁方法以提高乳酸菌蛋白以及各種代謝產(chǎn)物的獲得率具有重要的意義和應(yīng)用價值。我們需要根據(jù)細胞的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成選擇合適的破壁方法，采用微生物發(fā)酵提取技術(shù)，高壓細胞破壁儀可以通過空化效應(yīng)引起的沖擊波和剪切力使細胞破碎，提取乳酸菌內(nèi)源蛋白、表達的外源蛋白以及多種代謝產(chǎn)物。
應(yīng)用方案
通過高壓細胞破碎儀使物料在柱塞作用下進入可調(diào)節(jié)壓力大小的閥組中經(jīng)過特定寬度的限流縫隙均質(zhì)區(qū)在均質(zhì)閥內(nèi)產(chǎn)生三種效應(yīng):空穴效應(yīng)、撞擊效應(yīng)、剪切效應(yīng)的機械作用力從而打破細胞壁的束縛，把蛋白質(zhì)從組織或細胞中釋放出來盡可能保持原來的天然狀態(tài)，不喪失活性，達到高效率破碎細胞的效果。即使用高壓勻漿破碎法采用高壓細胞破碎法，在細胞內(nèi)產(chǎn)生的壓力效應(yīng)，從而能夠有效地提取出蛋白質(zhì)，且處理量大、破碎速度較快。這是一種機械處理細胞，物理抽提方法。
解決方案
首先富集菌體，收集胞內(nèi)產(chǎn)物的細胞或菌體。然后進行細胞重懸，用適當(dāng)?shù)木彌_液或培養(yǎng)液將離心或沉降等方法得到的固體（沉淀、細胞、活性物質(zhì)等等）重新懸浮。其次進行細胞破碎，使產(chǎn)物轉(zhuǎn)移到液相中。最后收集含生化物質(zhì)的液相，進行碎片分離，分離除去細胞、菌體、細胞碎片、蛋白質(zhì)的沉淀物和絮凝體等固體懸浮物，得到上清液或濾液。然后從澄清的濾液中提取胞內(nèi)產(chǎn)物，從細胞裂解物中獲取目標產(chǎn)物。
PhD優(yōu)勢
胞內(nèi)表達的優(yōu)點是表達量高，糖基化程度很低或無糖基化，由于是在胞內(nèi)進行表達，因此對培養(yǎng)基及發(fā)酵條件要求不高，不易造成蛋白質(zhì)的降解，并且胞內(nèi)表達的重組蛋白具有良好的活性和生物安全性，更容易實現(xiàn)高密度發(fā)酵表達目的蛋白等，尤其是針對需要表達且不會過糖基化且有生物活性的異源蛋白，采用胞內(nèi)表達更為合適，但是胞內(nèi)表達需要對細胞進行破碎才可以收集產(chǎn)物。采用高壓細胞破碎法，在細胞內(nèi)產(chǎn)生的壓力效應(yīng)，從而能夠有效地提取出蛋白質(zhì)，且處理量大、破碎速度較快。這是一種機械處理細胞，物理抽提方法。
◆破壁能力：高壓設(shè)計，輕松上壓；均質(zhì)效率高，工藝穩(wěn)定；穩(wěn)定的破碎能力，更高的胞內(nèi)物提??；純機械破碎，無化學(xué)污染；可放大工業(yè)化生產(chǎn)工藝設(shè)備
◆控溫效果：獨特溫控設(shè)計，內(nèi)置和外置雙向控溫，確保均質(zhì)過程及出料溫度可控。
◆活性保障：循環(huán)的控溫系統(tǒng)，蛋白活性不失活，細胞破碎后，活性保值高達99%
◆無菌保障：金屬結(jié)構(gòu)連接，沒有O型圈或墊片，無死角設(shè)計；在線排空結(jié)構(gòu)設(shè)計；所有機型均可實現(xiàn)在線清洗（CIP）、循環(huán)清洗、拆裝清洗、在位滅菌（SIP）
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