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文章導(dǎo)讀 細(xì)胞破碎技術(shù)是分離純化細(xì)胞內(nèi)合成的非分泌型生化物質(zhì)(產(chǎn)品)的基礎(chǔ)。
技術(shù)詳情

PhD低溫細(xì)胞破碎儀

PhD低溫細(xì)胞破碎儀的原理

       由電源(220V/380V, 60/50 Hz) 驅(qū)動(dòng)PhD高壓均質(zhì)機(jī)的泵柱塞做往復(fù)運(yùn)動(dòng),物料在柱塞作用下,進(jìn)入可調(diào)節(jié)壓力大小的閥組中,經(jīng)過(guò)特定寬度的限流縫隙(均質(zhì)區(qū)),瞬間失壓的物料以極高的流速(1000-1500米/秒)噴出,在均質(zhì)閥內(nèi)產(chǎn)生至少三種效應(yīng):空穴效應(yīng)、撞擊效應(yīng)、剪切效應(yīng)。經(jīng)過(guò)這多種力學(xué)效應(yīng)相互作用處理過(guò)后,細(xì)胞破碎率大于99%。


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生物類(lèi)適用案例

       酶工程、人用疫苗、獸用疫苗、HPV疫苗、融合蛋白、核酸、胰島素、試劑、抗體等。

       眾多的生物制品廠(chǎng)、藥廠(chǎng)、高校、科研院研究所,將大腸桿菌、酵母菌,或海洋澡類(lèi)細(xì)胞等,放入PhD高壓均質(zhì)機(jī),加壓至1500-2000bar,將細(xì)胞壁進(jìn)行破壁,提取細(xì)胞內(nèi)的蛋白、酶類(lèi)等有效成份,制成疫苗、試劑、抗體等,已帶來(lái)可觀(guān)的收益。

細(xì)胞破碎(cellrupture)技術(shù)

       指利用外力破壞細(xì)胞膜和細(xì)胞壁,使細(xì)胞內(nèi)容物包括目的產(chǎn)物成分釋放出來(lái)的技術(shù)。細(xì)胞破碎技術(shù)是分離純化細(xì)胞內(nèi)合成的非分泌型生化物質(zhì)(產(chǎn)品)的基礎(chǔ)。隨著重組DNA技術(shù)和組織培養(yǎng)技術(shù)上的重大進(jìn)展,以前認(rèn)為很難獲得的蛋白質(zhì)現(xiàn)在可以大規(guī)模生產(chǎn)。

高壓均質(zhì)破碎法(homogenization)

       在歐美、中國(guó)、日本、韓國(guó)等多個(gè)國(guó)家,高壓均質(zhì)機(jī)是常用的細(xì)胞破碎設(shè)備。美國(guó)PhD高壓均質(zhì)機(jī),其結(jié)構(gòu)由電機(jī)驅(qū)動(dòng)泵體,進(jìn)而在均質(zhì)閥體內(nèi)生成壓力。細(xì)胞漿液通過(guò)止回閥進(jìn)入均質(zhì)閥體內(nèi),在高壓下迫使其在均質(zhì)閥的小孔中高速?zèng)_出,且由于瞬間減壓和高速?zèng)_擊,使細(xì)胞同時(shí)受到高的液相剪切效用、空穴效用、撞擊效用而破碎。在操作方式上,可以采用單次通過(guò)高壓均質(zhì)機(jī)或多次循環(huán)通過(guò)等方式,也可連續(xù)操作。為了控制溫度的升高,PhD同時(shí)采用內(nèi)置式冷卻和外部冷卻的方式,使出料最低溫度能控制在0-10℃左右。在工業(yè)規(guī)模的細(xì)胞破碎中,對(duì)于大腸桿菌,用美國(guó)PhD高壓均質(zhì)機(jī),在15,000psi(1,035bar),均質(zhì)一次即可達(dá)用用戶(hù)要求;對(duì)于酵母等難破碎的及濃度高或處于生長(zhǎng)靜止期的細(xì)胞,常采用均質(zhì)壓力在25,000psi(1,720bar)的情況下均質(zhì)。


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1、適用案例:酶工程人用疫苗,獸用疫苗,HPV疫苗,融合蛋白,核酸,胰島素,試劑,抗體等

2、表達(dá)載體:大腸桿菌,酵母菌,動(dòng)物細(xì)胞,結(jié)核桿菌,芽孢桿菌,嗜熱桿菌等

3、一般工藝流程為:通過(guò)菌種轉(zhuǎn)基因的方式表達(dá)蛋白或核酸等物質(zhì),經(jīng)過(guò)破碎細(xì)胞壁,離心純化的手段得到最終的產(chǎn)品,DNA轉(zhuǎn)接→菌種培養(yǎng)→獲得濕菌體→緩沖液重懸→破碎細(xì)胞壁→離心→純化

4、溫度控制:-10-30℃冷媒介質(zhì)+PhD控溫均質(zhì)閥+無(wú)菌換熱器

5、溫度范圍:-5-70℃ (通??販卦?-10℃內(nèi))

6、材質(zhì):SS316L衛(wèi)生級(jí)不銹鋼,無(wú)菌接口設(shè)計(jì),直管式換熱器無(wú)死角

7、破碎壓力 :PhD高壓均質(zhì)機(jī)從實(shí)驗(yàn)型均質(zhì)機(jī)到生產(chǎn)型設(shè)備,最大壓力均可達(dá)2750bar,適用大部分生物學(xué)菌體的破碎,適合研發(fā)→生產(chǎn)的同步放大。

細(xì)胞破碎效果圖:

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